产品货号：
KL220163
中文名称：
CI混合液(DNA/RNA纯化)
英文名称：
产品规格：
250mL
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1～3天
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本制品是Chloroform与Isoamyl Alcohol的24:1的混合液，用于核酸提取时去除蛋白质、多糖、脂类和酚类等杂质。
在基于苯酚的核酸纯化中，苯酚的作用是使裂解液中的蛋白质变性，同时抑制核酸酶对核酸的降解。用苯酚处理裂解液时，由于蛋白分子表面的很多极性基团与苯酚相似相溶，故蛋白分子溶于酚相，而核酸溶于水相，从而将核酸和蛋白质分开。但苯酚和水有10%左右的互溶，因此酚抽提后，必须用CI混合液处理以让水和酚彻底分开，彻底去除水相中10%左右的残留苯酚，否则它们会严重抑制后续的酶反应。CI混合液中异戊醇的作用是降低表面张力，从而减少操作过程（常常有震荡步骤）中气泡的产生，而这些气泡的表面张力可能会使核酸断裂。另外，异戊醇还有助于水相和酚相分相，使离心后的上层水相（含核酸）、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定，便于移取上清。
| 组分 | 规格 |
| CI混合液(核酸纯化) | 250mL |
| 说明书 | 1份 |
保存：室温，有效期1年。
如果用于沉淀法回收核酸，则需要无水乙醇或异丙醇、3M乙酸钠溶液pH5.2、75%乙醇和超纯水。如果用于过柱法回收核酸，则需要硅胶模离心吸附柱，上柱液，洗柱液和超纯水。
该试剂为基于苯酚的核酸提取过程中的必须试剂，使用方法参考分子克隆手册等参考书，或实验室。
一、沉淀法
- 将0.5mL含核酸的细胞裂解液，或含有核酸、DNA、蛋白质、脂类的混合液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 加入0.5mL的自备Tris-饱和酚（对DNA纯化）或酸酚（对RNA纯化）和0.2mL的本制品。
- 涡旋震荡2分钟。
- 常温13000g离心5分钟，溶液将呈两层相。将含有核酸的水相转移到一个新的离心管中。两相的相对位置跟样本比重有关，并不是任何时候无色水相都在上层。如果样本含盐浓度高，比重大，水相也可能在下层。
- 在上清中加入0.1倍体积的3M乙酸钠溶液，pH5.2和两倍体积的自备无水乙醇（两倍体积的乙醇可以用一倍体积的异丙醇替代），颠倒10次充分混匀。
- 常温13000g离心15分钟。
- 小心弃上清，不要触及管底离心面的沉淀。
- 加入1mL 75%乙醇，颠倒10次。
- 常温13000g离心3分钟。
- 小心弃上清后短暂离心30秒，去掉残留的液体（约50μL）。
- 室温敞开盖子两分钟。
- 加入超纯水溶解核酸，然后进行浓度测定、电泳，PCR等后续检测。
二、过柱法
- 将0.5mL含核酸的细胞裂解液，或含有核酸、DNA、蛋白质、脂类的混合液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 加入0.5mL的自备Tris-饱和酚（对DNA纯化）或酸酚（对RNA纯化）和0.2mL的本制品。
- 涡旋震荡2分钟。
- 常温13000g离心5分钟，溶液将呈两层相。将含有核酸的无色水相转移到一个新的离心管中。两相的相对位置跟样本比重有关，并不是任何时候无色水相都在上层。如果样本含盐浓度高，比重大，也可能在下层。
- 在上清中加入2倍体积的自备上柱液，所用体积跟所用上柱液的配方相关。
- 颠倒混匀，取0.7mL样本和上柱液的混合液上柱。
- 常温13000g离心半分钟，弃穿透液。
- 再取0.7mL样本和上柱液的混合液上同一个柱子。
- 常温13000g离心半分钟，弃穿透液。
- 重复第20～21步，直到混合液全部上柱。
- 加入0.7mL洗柱液。
- 常温13000g离心半分钟，弃穿透液。
- 重复第23和第24步一次。
- 不加任何溶液，将吸附柱离心半分钟。
- 在吸附柱中加入30～50μL的超纯水，室温放置2分钟后，将吸附柱放入一个新的1.5mL离心管中，13000g离心半分钟，收集的穿透液就是纯化的核酸溶液。
- 对所得的核酸溶液进行浓度测定、电泳，PCR等后续检测。
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